Sistem tečne hromatografije visokih performansi (HPLC) je važna grana hromatografije i nezaobilazna je tehnologija razdvajanja i analize u oblastima moderne hemije, medicine, industrije, poljoprivrede, inspekcije robe i sudske inspekcije. Koristi tečnost kao mobilnu fazu i koristi sistem za infuziju pod visokim pritiskom za pumpanje jednog rastvarača sa različitim polaritetima ili mešanih rastvarača, pufera itd. u hromatografsku kolonu opremljenu stacionarnom fazom visoke efikasnosti. Nakon što se komponente u koloni odvoje, one ulaze u detektor na detekciju, čime se postiže efikasna, brza i osjetljiva analiza uzorka.
Strukturne komponente
Sistem tečne hromatografije visokih performansi uglavnom uključuje rezervoare za tečnost, infuzione pumpe visokog pritiska, uzorkivače, hromatografske kolone, detektore, snimače i uređaje za obradu podataka. Među njima, infuziona pumpa visokog pritiska je jedna od ključnih komponenti čitavog sistema, koja je odgovorna za slanje mobilne faze u hromatografsku kolonu sa stabilnim pritiskom i protokom. Kromatografska kolona je ključna komponenta odvajanja, ispunjena stacionarnom fazom sa izuzetno finim česticama. Koeficijenti raspodjele različitih spojeva između stacionarne i mobilne faze su različiti, čime se postiže razdvajanje. Detektor konvertuje odvojene komponente u električne signale, a zatim grafik i rezultate šalje preko rikordera i uređaja za obradu podataka.
Kako to radi
Princip rada sistema tečne hromatografije visokih performansi zasniva se na principu razdvajanja hromatografije, to jest, kada svaka komponenta rastvorena u mobilnoj fazi prođe kroz stacionarnu fazu, ima različite veličine i jačine interakcije sa stacionarnom fazom (adsorpcija, distribucija, isključenje i afinitet), tako da je vreme stacionarne faze različito nakon jedne faze stacionarne faze u stacionarnoj fazi. drugi. Konkretno, pumpa visokog pritiska prodire u mobilnu fazu u rezervoaru za skladištenje tečnosti u sistem, a rastvor uzorka ulazi u mobilnu fazu kroz injektor i ubacuje se u hromatografsku kolonu kako mobilna faza teče. Budući da su koeficijenti distribucije komponenti u otopini uzorka različiti u mobilnoj fazi i stacionarnoj fazi, kada se dvije faze pomjeraju jedna u odnosu na drugu, nakon kontinuiranog procesa adsorpciono-desorpcione raspodjele, razmak između pomiješanih komponenti se postepeno otvara, i konačno teče iz kolone u nizu kao zasebne pojedinačne komponente. Detektor pretvara koncentraciju uzorka u električni signal i prenosi ga na rekorder da ispiše podatke uzorka u obliku grafikona.
Prednosti i primjene
Sistem tečne hromatografije visokih performansi ima karakteristike visoke efikasnosti odvajanja, velike brzine analize, dobre osetljivosti detekcije i sposobnosti da analizira i odvaja termički nestabilne fiziološki aktivne supstance sa visokim tačkama ključanja i ne mogu da se ispare. Opseg njegove primjene je širok i gotovo nije ograničen volatilnošću i termičkom stabilnošću analitičkih objekata. Gotovo sva jedinjenja, uključujući visoku tačku ključanja, polaritet, jonska jedinjenja i makromolekularne supstance, mogu se analizirati i odrediti tečnom hromatografijom visokih performansi. U oblastima farmacije, tradicionalne kineske medicine i tradicionalne kineske medicine, nauke o hrani i tehnologije, sistemi tečne hromatografije visokih performansi se široko koriste u analizi lekova, istraživanju otisaka prstiju kineske medicine, detekciji ostataka pesticida, analizi nutritivnih komponenti hrane itd.
Trendovi razvoja
Sa brzim razvojem moderne biotehnologije i farmaceutske industrije, sistemi tečne hromatografije visokih performansi se takođe stalno razvijaju i poboljšavaju. Trenutni trend razvoja je da se naginje ka biohemijskoj analizi i pripremi lijekova, te da se razviju efikasnije, osjetljivije i brže metode razdvajanja i analize. Istovremeno, kao odgovor na probleme visoke potrošnje i toksičnosti mobilnih faza, aktivno se istražuju i ekološki prihvatljive i održive alternative.
Da sumiramo, sistemi tečne hromatografije visokih performansi igraju sve važniju ulogu u oblasti moderne nauke i tehnologije sa svojim jedinstvenim mogućnostima razdvajanja i analize i širokim perspektivama primene.
